南京博研生物科技有限公司供给的小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒的具体试验过程如下:
:首要,将一切试剂和样本康复至室温,保证规范品、质控品和样品做复孔以增加试验的可靠性 。
:从铝箔袋中取出所需板条,剩下的板条用自封袋密封放回冰箱。设置规范品孔、0值孔、空白孔和样本孔,参加不同浓度的规范品、样本稀释液和待测样本 。
:弃去液体,每孔参加洗涤液洗板,重复5次。运用洗板机时,增加浸泡30秒的程序以进步检测精度 。
:除空白孔外,规范品孔、0值孔和样本孔,参加辣根过氧化物酶(HRP)符号的检测抗体100μL 。
:揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20秒,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复5次 。
:将底物A和B按1:1体积充沛混合,一切孔中参加底物混合液100μL。用封板膜盖住反响板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育15分钟 。
:一切孔参加中止液50μL,在450nm波长酶标仪上读取各孔吸光度(OD值)。
:以规范品浓度做为横坐标,对应的吸光度(OD值)作为纵坐标,使用核算机软件,选用四参数Logistic曲线-pl),创立规范曲线方程,经过样本的吸光度(OD值),使用方程核算样品的浓度值 。
以上过程供给了南京博研生物小鼠HMGB-1 ELISA试剂盒的具体试验流程,以保证试验的准确性和可靠性。
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